《表1 人WDR79启动子扩增引物序列》

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《人WDR79基因启动子表达载体的构建及鉴定》


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针对WDR79的启动子序列和质粒pGL3-Basic的酶切位点,设计并合成PCR扩增引物(如表1)。以人基因组DNA模板,以表1中引物扩增人WDR79基因5'侧翼启动子区650 bp的DNA序列,扩增PCR片段经酶切、纯化后,与质粒p GL3-Basic按照1:5的摩尔比例在T4连接酶的作用下进行连接,连接产物经转化、细菌培养和质粒小提后,进行限制性内切酶Kpn I和Sma I双酶切鉴定,同时将重组后的质粒进行测序分析(上海生工),以证实其正确性。