《表2 本文中所用引物：热带假丝酵母磷酸甘油酸激酶基因启动子功能鉴定》

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《热带假丝酵母磷酸甘油酸激酶基因启动子功能鉴定》

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注：酶切位点部分用下划线标出

将扩增所得的P846、yeGFP3和T片段等摩尔加入融合PCR(SOE PCR）反应体系：PrimeSTAR HS酶0.5μL，5×PrimeSTAR Buffer 10μL，dNTPs 4μL，P846 1μL，yeGFP3 2μL，T 1μL和ddH2O 31.5μL。反应条件：98℃3 min；98℃10 s，55℃2 min，72℃2 min，10个循环；72℃10 min。以10μL上述融合反应液为模板，重新配置PCR反应体系：PrimeSTAR HS酶0.5μL，5×PrimeSTAR Buffer 10μL，dNTPs 4μL，融合反应液10μL，引物PGK2/PGK7各1μL和ddH2O 22.5μL。反应条件：98℃3 min；98℃10 s，55℃1 min，72℃2 min，30个循环；72℃，10 min，获得P846-yeGFP3-T表达盒。本实验中所用引物见表2。