《表2 试验中所用的引物:玉米早期籽粒中强表达启动子的筛选》

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《玉米早期籽粒中强表达启动子的筛选》


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为了方便后期转基因植株的筛选,在p YBA1132表达载体上加入草铵膦抗性基因Bar,具体构建流程为,设计引物Bar-F,Bar-R(表2),以质粒p GM-0229-2为模板进行PCR扩增,反应程序为:94oC预变性2min;98oC 10s,55oC 30s,68oC30s,35个循环;72oC延伸10min,获得Bar基因。PCR产物切胶回收后连接至p EASY T5 Zero克隆载体上,获得的单克隆由生工生物工程(上海)有限公司进行测序,测序正确的载体命名为T5-Bar。