《表1 所用引物序列：白斑综合症病毒极早期蛋白WSV403相互作用蛋白的筛选》

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《白斑综合症病毒极早期蛋白WSV403相互作用蛋白的筛选》

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注:下划线表示5'附加的与线性载体两端同源的碱基序列

本研究利用不依赖于连接酶的克隆方法（Ligation Independent Cloning，LIC）进行基因克隆[18]。以实验室保存的含有WSV403基因的质粒为模板，用WSV403-LIC-F以及WSV403-LIC-R引物（表1）进行PCR扩增，在其两端引入与载体插入位点两端同源的序列；将pLL-Strep-FLAG用Bam HI和Xho I酶切。用琼脂糖凝胶电泳检测并纯化回收目的条带与酶切载体之后，利用核酸外切酶III将WSV403基因连接到p LL-Strep-FLAG载体上[19]，获得pLL-Strep-FLAG-WSV403。其中WSV403与Strep以及FLAG标签融合表达。