《表1 引物名称及序列：月季RhNAC31互作蛋白的筛选及分析》

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《月季RhNAC31互作蛋白的筛选及分析》

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参考Dai等（2012）和Jeong等（2009）的方法，将RhNAC31的转录激活区域C端（157～286aa）划分为2个片段：RhNAC31-C1（157～250 aa）和RhNAC31-C2(251～286 aa）。分段设计带有酶切位点的引物扩增RhNAC31 C端的2个片段（表1），1%琼脂糖凝胶电泳检测，利用TaKaRa Mini BESTAgarose Gel DNA Extraction Kit试剂盒（大连TaKaRa公司）回收目的条带。将回收产物与克隆载体pMD18-T连接，连接产物转化大肠杆菌DH5α中。挑取单菌落鉴定，根据菌落PCR结果，将鉴定出的阳性克隆交由青岛派森诺生物科技股份有限公司测序。将测序正确序列利用上海生工生物有限公司SanPrep柱式质粒DNA小量抽提试剂盒（NO.B518191）提取质粒。采用限制性内切酶Eco RⅤ和Bam HⅠ构建酵母pGBKT7表达载体。通过测序验证重组诱饵载体pGBKT7-RhNAC31-C1和pGBKT7-RhNAC31-C2构建成功。