《表1 引物名称及序列[31]》

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《乌贼DNA条形码的筛选与验证》

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注:Ⅲ组引物中粗体字母代表加尾引物部分，即M13的测序引物。

本实验中用到7组引物（如表1所示），其中18S rRNA引物是真核生物的保守序列引物，一般作为内参用于真核生物DNA质量的鉴定[31]。其次，目前常用的DNA条形码COI序列有多组扩增引物，还有使用多条引物的多重PCR反应体系。本实验主要选取3组COI基因常用引物组合进行测试，并以12S rRNA和16S rRNA基因引物作为备选，旨在从现有常用引物中选择适于乌贼鉴定的引物。另外，在乌贼的12S rRNA保守序列中设计一对用于扩增乌贼DNA的特异性引物。所有引物在杭州擎科生物技术有限公司合成，稀释至10μmol/L备用。