《表1 扩增引物名称及序列》

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《239例治疗失败的HIV感染者HIV-1亚型及耐药分析》

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用QIAamp Viral RNA Mini Kit试剂盒（德国Qiagen公司）提取HIV RNA，具体操作按试剂说明书进行。以此RNA为模板进行反转录和巢式聚合酶链式反应（PCR）扩增。用一步法RT-PCR方法完成逆转录和第一轮PCR扩增（Invitrogen Super Script IIITM One-Step RT-PCR with Platinum Taq Kit，购于普洛麦格），再以第一轮PCR产物为模板进行第二轮PCR扩增。扩增引物名称及序列见表1。经过两轮扩增，得到包括HIV pol区蛋白酶（PR）基因全长和反转录酶（RT）前300个氨基酸位点的目的片段，基因序列总长为1 300 bp[3]。扩增产物用1%琼脂糖凝胶电泳检验，并对阳性产物进行测序。