《表1 试验所用引物名称及序列》

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《龙眼SPS基因克隆及其表达分析》

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根据GenBank上已发表的其他物种中性转化酶基因序列，利用Primer Premier5.0设计PCR引物DlSPS-For和DlSPS-Rev（表1）。以cDNA为模板，PCR扩增DlSPS基因的中间片段，用1%琼脂糖凝胶电泳检测扩增片段，切胶回收目的片段，连接至pMD20-T载体上，转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，通过PCR鉴定出阳性克隆，将其送至生工生物工程（上海）股份有限公司测序。根据扩增获得的片段序列，利用Primer Premier 5.0，按照3'-Full RACE Core Set Ver.2.0试剂盒要求设计3'-RACE引物（DlSPS-3'RACE Outer和DlSPS-3'RACE Inner）（表1），按照Clontech SMARTTM RACE cDNA Amplification Kit试剂盒要求设计5'-RACE引物（DlSPS-5'RACE）（表1），严格按照上述两种试剂盒说明进行PCR扩增，切胶回收目的片段，后续连接、转化、鉴定和测序同上。