《表2 试验所用引物名称和序列》
提取马铃薯青薯9号块茎总RNA,并进行反转录。以青海省农林科学院生物技术研究所转录组数据中差异基因4CL序列为参考,设计引物St4CL-F和St4CL-R(表2),进行PCR扩增。PCR反应体系为2×FastTaq PCR Master Mix 10μL、引物各0.5μL、cDNA 2μL和ddH2O 7μL。PCR扩增程序为95℃3 min;95℃20 s,71℃20 s,72℃1min,共35个循环;72℃5 min;4℃保存。PCR产物经2%琼脂糖凝胶电泳进行检测,回收目的条带,与PLB载体重组,转化大肠杆菌感受态细胞DH5α中,涂板于含有氨苄(Amp)的LB培养基上,37℃过夜。挑取单克隆筛选阳性,送上海生工公司测序。
图表编号 | XD007448600 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.11.26 |
作者 | 谢海娟、范希德、叶广继、周云、王舰、杨永智 |
绘制单位 | 青海大学、青海大学、青海大学、青海省农林科学院青海大学省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室青藏高原生物技术教育部重点实验室青海省马铃薯育种重点实验室、青海大学、青海省农林科学院青海大学省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室青藏高原生物技术教育部重点实验室青海省马铃薯育种重点实验室、青海大学、青海省农林科学院青海大学省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室青藏高原生物技术教育部重点实验室青海省马铃薯育种重点实验室、青海大学、青海省农林科学院青海大学省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验 |
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