《表1 试验所用引物及其序列》
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《嗜水气单胞菌感染影响中国大鲵核因子45和90表达》
根据本实验室已测大鲵皮肤转录组的数据得到NF45和NF90的拼接序列,采用Primer Premer5.0设计特异性引物扩增其序列.引物序列见表1,使用高保真PCR试剂盒2*Phanta Master Mix(Vazyme,Nanjing,China)进行PCR反应.PCR的扩增体系为2×Phanta?Master Mix 25μL,模板cDNA 2μL,上下游引物(10μmol/L)各2μL,去离子双蒸水19μL.PCR的扩增程序为95℃预变性5 min;95℃变性30 s,50℃退火30 s,72℃延伸15 s,共34个循环;72℃再延伸5 min.取PCR产物,用1.5%琼脂糖凝胶电泳,EB染色后用凝胶成像仪观察电泳结果.然后对目的片段进行琼脂糖凝胶回收,步骤根据DNA琼脂糖凝胶回收试剂盒(Axygen)进行.
图表编号 | XD00158921500 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.08.25 |
作者 | 商文聪、邓晟、杨圆圆、王慧、白禹、李灿 |
绘制单位 | 贵阳学院生物与环境工程学院贵州省山地珍稀动物与经济昆虫重点实验室贵州省大鲵可持续利用协同创新中心、贵阳学院生物与环境工程学院贵州省山地珍稀动物与经济昆虫重点实验室贵州省大鲵可持续利用协同创新中心、贵阳学院生物与环境工程学院贵州省山地珍稀动物与经济昆虫重点实验室贵州省大鲵可持续利用协同创新中心、贵阳学院生物与环境工程学院贵州省山地珍稀动物与经济昆虫重点实验室贵州省大鲵可持续利用协同创新中心、贵阳学院生物与环境工程学院贵州省山地珍稀动物与经济昆虫重点实验室贵州省大鲵可持续利用协同创新中心、贵阳学院生物与环境工 |
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