《表1 PCR扩增所用引物及其序列》

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《四川地区华重楼(Paris polyphylla var.chinensis)主要病害调查及病原菌鉴定》


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采用CTAB法提取供试病原菌基因组DNA (赵志祥等,2013;Fu et al.,2014),以DNA为模板,用引物对供试病原菌的ITS、HSP60、G3PDH、RPB2、TEF、ACT、LSU、Alt琢1、TUB等基因进行PCR扩增(表1)。PCR扩增体系均为50滋L:DNA模板2滋L、引物各2.5滋L、2伊Taq Master Mix 25滋L、dd H2O补足至50滋L。反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性60 s,55℃退火30 s,72℃延伸60 s,35个循环;72℃终延伸8 min。扩增产物用1.2%琼脂糖凝胶进行电泳检测,然后将PCR产物送往成都擎科梓熙生物公司进行测序。