《表3 PCR扩增所用引物序列》

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《马铃薯stuProT1.2基因的克隆与非生物胁迫的表达分析》

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根据实时定量PCR引物设计原则，利用Primer Premier 5.0设计引物（表3）。以Actin作为内参基因。以上述反转录cDNA为模板，反应体系为20μL，参照2×T5 Fast qPCR Mix荧光定量试剂盒（北京擎科新业生物技术有限公司）说明进行操作，反应条件为95℃1 min，95℃10 s，60℃15 s，40个循环。每个样品均设置3个技术重复。仪器为Applied Biosystems Q5型定量PCR仪（美国），基因的相对表达量采用Livak和Schmittgen（2001）的2-ΔΔCT公式计算，分析stuProT1和stuProT2在不同组织和胁迫下的表达情况。