《表2 实时定量PCR扩增所用的引物序列》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《慢病毒介导shRNA干扰MAT2A与MAT2B基因抑制猪肌内脂肪细胞分化》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

根据NCBI中GenBank数据库中猪MAT2A和MAT2B以及成脂标志基因序列，采用Primer Primer 5.0设计qPCR定量引物，引物序列见表2。按照TRIzol试剂盒提取不同时间点收集的猪肌内脂肪细胞的RNA。按照Vazyme反转录试剂盒操作说明进行反转录，合成cDNA第一链；然后以此作为模板，采用IQ5（Bio-Rad公司）实时定量PCR系统检测基因表达情况。荧光定量反应体系为20μL:SYBR Mix为10μL，上下游引物各0.8μL (10μmol·L-1），cDNA模板为2μL，用ddH2O补至20μL。采用的扩增程序为95℃预变性10 min，95℃变性15 s，60℃退火20s，共40个循环。基因相对表达量采用2-ΔΔCt法计算，以β-actin作为内参基因。每组试验至少进行重复3次。