《表1 PCR扩增所用引物》
利用Gen Bank数据库中与槟榔同为棕榈科的油棕(Elaeis guineensis)的El CAT1 (XM010919942.3)、El CAT2 (NM-001319913.1)、El CAT3(XM010943120.3)的氨基酸序列,设计特异性引物CAT1F/CAT1R、CAT2F/CAT2R、CAT3F/CAT3R(表1),以基因组c DNA为模板,使用Prime STAR Max Premix(2?)高保真DNA聚合酶进行基因全长序列的扩增:98℃30 s;98℃15 s,53℃15 s,72℃5 s,扩增30个循环。扩增后的PCR产物,经1%琼脂糖凝胶电泳检测,用Fast Pure Gel DNA Extraction Mini Kit试剂盒(诺唯赞公司)回收目的基因片段,回收产物连接TA-Blunt载体(Ta Ka Ra),并转化至DH5α大肠杆菌感受态中,挑选阳性克隆送赛默飞世尔科技有限公司进行测序。将测序正确的菌液提取质粒并于?80℃保存备用。
图表编号 | XD00205260400 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.12.25 |
作者 | 梁婷、沈文涛、庹德财、言普、黎小瑛、唐庆华、周鹏 |
绘制单位 | 海南大学热带作物学院、中国热带农业科学院热带生物技术研究所、海南热带农业资源研究院、中国热带农业科学院热带生物技术研究所、海南热带农业资源研究院、中国热带农业科学院热带生物技术研究所、海南热带农业资源研究院、中国热带农业科学院热带生物技术研究所、海南热带农业资源研究院、中国热带农业科学院热带生物技术研究所、海南热带农业资源研究院、中国热带农业科学院椰子研究所、海南大学热带作物学院、中国热带农业科学院热带生物技术研究所、海南热带农业资源研究院 |
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