《表1 PCR扩增所用引物序列、扩增片段长度》

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《产ESBLs肺炎克雷伯菌药敏性和耐药基因表型分析》

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细菌DNA模板的制备：从低温冰箱中取出保存菌株，用接种环传种到血琼脂培养基上，然后快速将菌株放回低温冰箱，避免菌株反复冻融。在EP管中先加入2mL双蒸水，再刮取3～5个已培养18～24h的新鲜菌落置于EP管中，用移液枪轻轻混匀，置于沸水中煮10min，再放置于离心机中（4℃，12 000r/min）离心2min，上清液即为粗提DNA模板，用移液枪吸取上清液至无菌的EP管中，保存于-20℃冰箱备用。PCR扩增筛选的耐药基因包括blaCTX-M-1、blaCTX-M-9、blaTEM、blaSHV，所用引物序列及扩增片段长度见表1，引物均由西安擎科生物有限公司合成。