《表1 引物序列及扩增片段长度》

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《扶肾方调节各种细胞因子干预腹膜间皮细胞EMT的实验研究》

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按试剂盒步骤提取每组细胞总RNA，测定提取RNA纯度，逆转录反应合成cDNA，再进行qPCR，引物序列见表1。PCR反应体系：2×SYBR Premix Ex Taq 12.5μL，上、下游引物（10μmol/L）各0.5μL，模板2μL，加ddH2O至总体系25μL。扩增条件：95℃30 s，95℃5 s，60℃34 s，30个循环。将各样品cDNA稀释10倍后取2μL作模板，分别用目的基因引物和内参基因（GAPDH）引物进行扩增，重复检测孔道数为3，在60～95℃进行熔解曲线分析。采取2-ΔΔCt进行数据的相对定量分析。