《表1 基因引物序列及扩增片段长度》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱检测耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的价值》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

采用PCR方法检测33株CRKP中的碳青霉烯酶编码基因，包括bla GES、bla KPC、bla IPM、bla VIM、bla NDM和bla OXA-48，引物序列如表1所示。每种基因检测PCR扩增的反应总体积为20μl：包括重组耐热DNA聚合酶（日本Takara公司产品）1个单位（体积0.2μl），10倍浓度的缓冲液2μl；P1引物2μl （1.0μmol/L），P2引物2μl （1.0μmol/L）；d NTP混合液2μl（各种浓度均2 mmol/L）；超纯水7μl以及菌株DNA提取液4.8μl。PCR检测扩增热循环为：95℃预变性3 min，然后95℃变性0.5 min，55℃复性0.5 min，72℃延伸1.0 min，共30循环，最后72℃延长至5 min。经2%琼脂糖凝胶潜水式电泳20 min，出现与阳性对照分子量相同的条带即判别为阳性。对阳性产物进行测序并将获得的DNA序列与NCBI Gen Bank数据库（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank/）中的DNA序列进行比较。