《表1 MYH 7基因目标外显子扩增引物序列及其扩增片段长度》

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《散发性肥厚型心肌病MYH7基因突变位点筛查》


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注:F为正向引物,R为反向引物。

根据NCBI GenBank中的MYH7基因序列,应用Primer blast引物设计软件并根据含侧翼内含子序列进行相应外显子引物设计(表1)。设计的引物由上海生物工程公司合成。所用PCR扩增试剂为Premix TaqTM(EX TaqTM Version 2.0)。PCR反应体系25μL,其内含有DNA模板2.0μL,Premix12.5μL,上、下游引物各3μmol/L,灭菌水4.5μL。PCR扩增条件:98℃、10s,55~62℃、30s,72℃、1min,循环35次。扩增产物由上海生物工程公司进行克隆测序。