《表1 RHCE基因外显子扩增及测序引物》

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《RHCE(1)-D(2)-CE(3-10)基因引起RhD--表型1例》

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ABO、Rh血型采用试管法检测，抗体鉴定、吸收放散等血型血清学检测均按文献[4]操作，血液基因组D N A提取按厂家说明书操作，从E D T A-K2抗凝血中制备DNA，然后采用PCR-SBT技术，根据文献报道[5，6]设计引物对RHCE基因10个外显子进行扩增，RHCE外显子扩增及测序引物见表1。反应体系:DNA 1μL，dd H2O 15.3μL，下游引物0.5μL，下游引物0.5μL，dNTP 0.5μL，Taq酶0.2μL，10×Buffer 2μL。反应条件为:95℃10 min，1个循环；94℃45 s，58℃45 s，72℃30s，43个循环；72℃5 min。对扩增产物进行测序。