《表1 引物序列及扩增片段长度和退火温度》
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《三氧化二砷对膀胱癌T24细胞增殖及APC基因表达的影响》
以As2O3终浓度分别为0、2、4、8μmol/L的培养液作用T24细胞72 h后收集细胞,提取总RNA,测定其浓度及A260/A280比值。选择A260/A280位于1.8~2.0之间的RNA进行c DNA合成。按RT-PCR试剂盒说明书进行PCR反应。APC及内参β-actin的引物序列及扩增片段大小见表1。扩增条件:95℃预变性2 min,95℃30 s、退火30 s、72℃45 s,35个循环后72℃延伸5 min。产物在1.5%琼脂糖凝胶中进行电泳,Tanon凝胶成像系统拍照并扫描条带光密度值(D),以β-actin为内参对照,mRNA表达强度以D目的基因/Dβ-actin比值表达。试验重复3次。
图表编号 | XD001010700 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2018.08.15 |
作者 | 孙军培、刘久华、杜丹丽、杨晓东、张燕 |
绘制单位 | 蚌埠医学院第一附属医院生殖医学中心、蚌埠医学院附属连云港市第二人民医院东院区泌尿外科、蚌埠医学院第一附属医院生殖医学中心、蚌埠医学院第一附属医院生殖医学中心、蚌埠医学院第一附属医院生殖医学中心 |
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