《表1 6 对SSR引物序列、退火温度和目标片段长度》
葡萄叶片样品基因组DNA提取采用王军等[1 3]改良的十六烷基三甲基溴化铵法。选用6对(VVS2、VVMD5、VVMD7、VVMD27、Vrzag62、Vrzag79)葡萄种植资源数据库(http://www.vitis-vea.de/)提供的引物用于SSR扩增,引物序列见表1。PCR体系为20μL,包括2μL 10×PCR buffer、1 U Taq酶、0.2 mmol/L dNTP、1.5 mmol/L Mg2+、0.4μmol/L引物、DNA模板50 ng,其余为dd H2O。PCR扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,50~60℃退火30 s,72℃延伸40 s,35个循环;72℃延伸10 min。相同模板重复扩增两次,以保证结果的准确性。扩增后产物送至苏州金唯智生物科技有限公司进行毛细管电泳,利用Genemapper V3.2软件进行条带分析,确定每个位点的片段长度。
图表编号 | XD0075136900 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.06.15 |
作者 | 彭文婷、王雯染、杨航宇、陈为凯、杨哲、何非、王军 |
绘制单位 | 中国农业大学食品科学与营养工程学院葡萄与葡萄酒研究中心、农业农村部葡萄酒加工重点实验室、中国农业大学食品科学与营养工程学院葡萄与葡萄酒研究中心、农业农村部葡萄酒加工重点实验室、中国农业大学食品科学与营养工程学院葡萄与葡萄酒研究中心、农业农村部葡萄酒加工重点实验室、中国农业大学食品科学与营养工程学院葡萄与葡萄酒研究中心、农业农村部葡萄酒加工重点实验室、中国农业大学食品科学与营养工程学院葡萄与葡萄酒研究中心、农业农村部葡萄酒加工重点实验室、中国农业大学食品科学与营养工程学院葡萄与葡萄酒研究中心、农业农村部葡萄 |
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