《表1 本文所用引物的序列及其扩增的模板与区段》

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《利用CRISPR/Cas9技术编辑水稻植酸合成酶IPK1基因》

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注:a:下划线碱基为GoldenGate的接口碱基；b:\""pICSL002208系列\""指pICSL002208及以其为初始载体构建的系列载体；c:\""单\""指sg67或sg41单个sgRNA，\""双\""指sg67和sg41两个sgRNA，\""单/双\""指\""单\""和\""双\"".\""上游\""指上游扩增引物，\""下游\""指下游扩增引物.

大肠杆菌菌株DH5α、根癌农杆菌菌株EHA105为本实验室保存.PCR产物克隆所用的载体为p MD19-T Simple Vector，购自宝生物工程（大连）有限公司.CRISPR/Cas9系列载体由英国John Innes Centre的Cristobal Uauy教授馈赠，其中p ICSL90002为sg RNA的表达提供拟南芥At U6启动子，p ICSL90003为sg RNA的表达提供小麦Tt U6启动子，p ICSL70001为sg RNA的表达提供tracr RNA框架，p ICSL002208为Cas9双元表达载体[15].所用引物由北京奥科鼎盛生物科技有限公司合成，其序列及用途见表1.