《表1 扩增HA和NA基因所用的引物和探针序列》

《表1 扩增HA和NA基因所用的引物和探针序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《H10N8亚型禽流感病毒双重荧光定量RT-PCR检测方法的建立》


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通过系统比较和分析Gen Bank和全球共享流感数据倡议组织(GISAID)中提供的104株H10N8亚型AIV的HA和NA基因序列,利用DNAStar软件进行同源性分析比较后,选择CK/JX/S3755/13株的HA(KP861987)和NA(KP861989)基因保守区,利用Primer Express 3.0软件设计扩增HA和NA基因的引物(包括两对引物H10-759F/H10-759R、N8-1057R/N8-1057R和探针H10-759P、N8-1057P)。在H10基因探针的5'末端标记报告基团FAM,在N8基因探针的5'末端标记报告基团JOE,在二者3'端均标记BHQ1淬灭基团(表1)。在保守区内利用Oligo6.0软件设计并合成针对H10和N8基因的RT-PCR扩增引物H10-F/H10-R、N8-F/N8-R(表1)。引物均由Life Technologies(中国北京)合成。