《表1 流感病毒NYMC BX-51B株的HA和NA基因引物序列》

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《B型流感病毒在MDCK细胞上的遗传稳定性》

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根据GenBank中登录的NYMC BX-51B型流感病毒的神经氨酸酶（neuraminidase，NA）（AGL06038.1） 和血凝素（hemagglutinin，HA）（AHA38216.1） 基因序列，利用DNA-STAR引物设计软件，设计该流感病毒HA和NA基因片段引物，序列见表1，引物由吉林省库美生物科技有限公司合成。采用Trizol法提取NYMC BX-51B尿囊液、M1代和M10代病毒总RNA，RT-PCR法扩增HA和NA基因。PCR反应条件:95℃预变性1 min；95℃变性20 s，退火20 s（退火温度为:BX-51B HA 53℃，BX-51B NA 56℃），72℃延伸1 min，共40个循环；72℃再延伸5 min。目的基因克隆、鉴定后，送吉林省库美生物科技有限公司测序，利用Vector NTI软件，根据测序结果分析各代次病毒与GenBank中登录的NYMC BX-51B型流感病毒HA和NA基因序列的差异。