《表1 RT-PCR扩增引物和探针序列》

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《基于致倦库蚊转录组的溴氰菊酯抗性相关基因分析》

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对致倦库蚊3个株系的蚊虫进行RNA提取，反转录生成cDNA。在NCBI上查询12个目标基因和内参基因RPL8、18S的CDS序列，使用Primer Express 3.0软件设计相应的引物和探针（表1)，RT-PCR检测基因表达量。以水为模板设置阴性对照。反应体系（20μl）为：PCR扩增聚合酶10μl，上、下游引物各0.4μl，探针0.8μl，DNA模板2μl，灭菌水6.4μl。反应条件为：95℃30 s；95℃5 s，60℃30 s，共40个循环；50℃30 s。用2-ΔΔCT法计算基因的相对表达量倍数，进行Log2FoldChange分析。