《表1 BTV和EHDV的RT-PCR荧光探针及扩增引物》

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《蓝舌病病毒和流行性出血病病毒双重荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用》

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根据本实验室在我国分离的35株BTV和15株EHDV的全基因序列，利用DNAStar软件的MegAlign进行序列对比分析，确定并选择BTV的NS3和EHDV的NS1基因保守区序列，利用Primer Express 3.0软件设计相应的特异性引物和分别用FAM和VIC荧光基团标记的TaqMan探针（表1）。引物和探针均由宝生物工程（大连）有限公司合成，纯度为HPLC级，并用无RNase的水稀释至10mol/L。