《表1 Flexal病毒（FLEV）和Whitewater Arroyo病毒（WWAV）实时荧光定量RT-PCR方法引物探针序列》

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《Flexal和Whitewater Arroyo两种高致病沙粒病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立》

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注：简并碱基R.A或G

沙粒病毒属中S片段普遍较L片段保守[4]，经序列比对将FLEV和WWAV检测靶基因位置为S片段编码核蛋白上，在此区域设计引物探针结果如表1所示。其中，设计引物的Tm值在55℃～58℃之间，探针的Tm值在65℃～68℃之间，探针Tm值高于引物Tm值8℃～10℃，GC含量在40%～70%之间，模拟实验结果显示引物间无交叉反应。后在探针的5'端标记FAM荧光报告基团，3'标记BHQ1荧光淬灭基团。