《表2 TaqMan探针和扩增引物序列》

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《猪波形蛋白的原核表达及其对口蹄疫病毒浸染PK-15细胞的作用》

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用不同浓度（10、30、50μg/mL）波形蛋白分别与500TCID50的PRRSV GSWW和100TCID50的FMDV O/GZSB/2010 37℃感作1h，然后分别接种于长成单层的Marc-145和PK-15细胞，并在不同时间点收样，样品经3次反复冻融后，提取病毒RNA，通过荧光定量PCR测定病毒拷贝数。荧光定量RT-PCR扩增体系为:2×RT-PCR buffer 10μL，Ex Taq HS 0.4μL，Prime Script RT Enzyme Mix 0.4μL，PCR Forward Primer 0.4μL，PCR Reverse Primer 0.4μL，Taq Man Probe 0.6μL，ROX Reference Dye 0.4μL，total RNA 2μL，RNase Free Water 5.4μL，总体系20μL。以T7体外转录试剂盒制备病毒RNA为标准品并定量，TaqMan探针和扩增引物见表2。