《表2 本文所用的引物及序列》

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《调控乙酰CoA合成酶表达促进乙酸利用及GlcNAc合成》

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pcreK构建过程见图2。首先以枯草芽孢杆菌168的基因组DNA为模板，以pcrek-L-F和pcrek-L-R为引物，扩增得到creK-L；再将质粒p7Z6用限制性快切酶Eco R I线性化；然后以胶回收后的creK-L为大引物，以Eco R I线性化的质粒p7Z6为模板扩增，将PCR产物直接转化E.coli JM109，次日用引物pcrek-L-F/pcrek-L-R进行菌落PCR验证，并挑取条带大小约2 000 bp的克隆子测序确认[21]。其次，以枯草芽孢杆菌168的基因组DNA为模板，以pcrek-R-F和pcrek-R-R为引物，扩增得到creK-R；然后以胶回收后的creK-R为大引物，直接扩增上述得到的阳性克隆子，PCR产物经DpnI消化后转化E.coli JM109，次日用引物pcrek-R-F/pcrek-R-R进行菌落PCR验证，并挑取条带大小约850 bp的克隆子测序确认，得到质粒pcreK。所用引物序列见表2。