《表1 本文所用引物：甘薯IbWRKY75的克隆、亚细胞定位及表达特性分析》

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《甘薯IbWRKY75的克隆、亚细胞定位及表达特性分析》

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利用甘薯二倍体近缘野生种三裂叶薯数据库（Sweetpotato Genome and Resource Database Entry，http://sweetpotato-garden.kazusa.or.jp/index.html）查找同源序列，比对甘薯转录组数据库（未发表数据）获得IbWRKY75基因序列，根据其开放阅读框（open reading frame，ORF）片段设计克隆引物IbWRKY75-PF/PR（表1），以cDNA为模板进行PCR扩增。扩增体系50μL:3μL cDNA、2μL 10 mmol·L-1IbWRKY75-PF、2μL 10 mmol·L-1 IbWRKY75-PR、25μL Mix和18μL ddH2O。扩增条件为:94°C预变性2 min；94°C变性30 s，54.1°C退火30 s，72°C延伸30 s，35个循环；72°C延伸2 min。PCR扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳分离。用Axygen割胶回收试剂盒回收目的条带，并连接至pMDTM19-T载体后转化大肠杆菌DH5α，获得阳性克隆，提取质粒送至上海生工公司进行测序。