《表1 本文所用引物序列表》

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《一种可促进重组蛋白表达量和稳定性的多功能纯化标签的开发与利用》

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自组装双亲短肽S1vw（HNANARARHNANA RARHNANARARHNARARAR）连同PT-linker（PTPPTTPTPPTTPTP）的编码基因由生工生物工程（上海）股份有限公司合成并插入至pET-22b（+）/pgl、pET-22b（+）/lox、pET-22b（+）/gfp的NdeⅠ和XhoⅠ酶切位点之间，分别获得PGL-S1vw、LOX-S1vw和GFP-S1vw融合酶的表达质粒pET-22b（+）/pgl-S1vw、pET-22b（+）/lox-S1vw和pET-22b（+）/gfp-S1vw（图1B）。并将pET-22b（+）/gfp-S1vw质粒作为模板，以表1中所列对应引物进行聚合酶链式反应（PCR）获得融合酶的表达基因片段，并用一步克隆酶融合至线性化的质粒pP43NMK及pPIC9K中，获得在枯草芽孢杆菌及毕赤酵母中的pP43NMK/gfp-S1vw和pPIC9K/gfp-S1vw表达质粒（图1B）。并用引物对DS-p P43-F/DS-pP43-R和DS-9K-F/DS-9K-R分别将S1vw和PT-linker表达基因从p P43NMK/gfp-S1vw和p PIC9K/gfp-S1vw中缺失，获得在枯草芽孢杆菌及毕赤酵母中表达的野生型GFP（图1A）。