《表1.本文所用引物:链霉菌IMS002的分类鉴定及其抗真菌活性物质解析》

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《链霉菌IMS002的分类鉴定及其抗真菌活性物质解析》


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接种链霉菌IMS002孢子于YEME培养基中,28°C振荡培养2 d,然后收集菌体进行链霉菌总DNA少量制备[17]。提取该菌株基因组DNA,并通过异丙醇进行沉淀。以该菌株基因组DNA为模板,采用表1中的引物进行PCR扩增。将扩增产物送到金唯智生物科技公司(北京)进行测序,获得16S rDNA(MK583689)、ATP合酶b亚基基因(atpD)(MK607456)、DNA解旋酶基因(gyrB)(MK607457)、重组酶基因(recA)(MK607458)、RNA聚合酶b亚基基因(rpoB)(MK607459)、色氨酸合成酶b亚基基因(trpB)(MK607460),用于链霉菌种间的鉴定。对这些基因序列进行串联后,提交至NCBI中的GenBank数据库进行BLAST分析比对。利用MEGA 6.0对16S rDNA和5个不同基因(atpD,gyrB,recA,rpoB,trpB)串联序列进行多重序列比对分析,通过Neighbor-Joining法构建系统发育树。