《表1.扩增NagZ703的引物序列》

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《一种来源于兼性嗜碱菌Bacillus pseudofirmus 703的β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶》

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将扩增得到的Nag Z703片段分别用Bam H I和Sal I进行酶切后，与经这两种酶消化的质粒载体pET28a连接；连接混合物转化E.coli XL10-Gold后，涂布于添加了卡那霉素（终浓度50μg/mL）的LB平板上，37°C培养12–16 h；挑取转化平板上的单菌落于3 mL添加了卡那霉素（终浓度50μg/mL）的LB液体培养基中，37°C培养过夜，然后收集菌体，从中抽提质粒；经琼脂糖凝胶电泳筛选出比p ET28a大的质粒，再用Bam H I和Sal I对质粒进行酶切，琼脂糖凝胶电泳检测，产生了大小分别为2 kb和5.4 kb两个DNA片段的质粒初步判定为重组质粒pET28a-NagZ703，将该质粒送至公司测序分析。