《表1 qPCR扩增的引物序列》

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《黄芪多糖对犬血清免疫球蛋白、IFN-γ水平及分泌型IgA表达的影响》


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mRNA相对表达量从-80℃取出肠段组织样本,分别用液氮研磨粉碎,加入1mL Trizol提取总RNA,使用Invitrogen的反转录试剂盒SuperscriptⅢ将提取的总RNA进行反转录,获得cDNA,-20℃保存,备用。根据GenBank中犬IgA及Actin的基因序列(GenBank登录号分别为AY_576788.1和NM_001003195.1),利用Primer Premier 5.0软件设计引物(表1),引物由上海生工生物工程股份有限公司合成。采用SYBR QPCR mix试剂,ABI-7900qPCR仪检测犬各肠段中IgA mR-NA的相对表达量,结果以2-ΔΔCt表示。