《表3 qPCR引物及扩增片段》

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《大麦蛋白质二硫键异构酶基因家族的鉴定与表达分析》

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我们先前的研究结果证实，HvPDIL5-1作为感病因子参与BaYMV/BaMMV病毒感染过程，该基因功能丢失可导致对大麦黄花叶病的广谱抗病性[30]。为了探究这些HvPDILs在大麦黄花叶病感染过程中的作用，我们分析了BaMMV接种后HvPDILs基因表达水平的变化。首先，以HvUBIQUITIN为内参基因[30]，采用BaMMV的特异性引物进行扩增（表3），qPCR证实接种后的叶片中含有BaMMV。随后，采用本研究设计的10对HvPDILs基因特异性引物（表3），分析在感病叶片和对照叶片中10个HvPDILs基因的相对表达水平。如图5所示，对照叶片中HvPDIL1-1、HvPDIL1-3和HvPDIL1-4这3个基因的表达水平较高，但是病毒感染后这些基因表达水平显著降低。HvPDIL5-1的表达水平很低，病毒接种后其表达水平也显著降低。HvPDIL5-4在感病叶片中的表达水平显著高于对照，说明病毒感染会诱导该基因表达。这些在病毒接种后出现显著表达差异的HvPDILs基因，很可能与BaMMV感染过程相关。而HvPDIL1-2、HvPDIL2-1、HvPDIL2-2、HvPDIL5-2及HvPDIL5-3这5个基因的表达水平没有发生显著性变化。