《表1 引物序列及扩增片段大小》

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《一起外籍船舶船员感染性腹泻的病原学检测》

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核酸检测阳性的标本、细菌培养阳性的标本和血清检测志贺样毒素stx1阳性的标本用五种致泻大肠诊断血清和O104∶H4血清进行凝集（1号、7号和8号标本）。将核酸检测阳性的标本和细菌培养阳性的标本进行O157和H7特异性基因和毒力因子的检测（7号和8号标本）。引物序列及扩增片段大小见表1。PCR反应体系:10×Buffer 5.0μl，2 mmol/L d NTPs 5.0μl，25 mmol/L Mg2+1.5μl，10 pmol/μl rfb E-F 1.0μl，10 pmol/μl rfb E-R 1.0μl，5 U/μl Taq酶0.25μl，模板1.0μl，去离子水33.25μl。反应条件:94℃预变性7 min，94℃变性1 min，56℃退火并延伸1 min，72℃，1 min，共40个循环，72℃1 min，反应体系50μl，检测时取样品5μl。电泳条件:160 V，400 m A，时间2 h 35 min。