《表1 引物序列与扩增片段大小分析》

《表1 引物序列与扩增片段大小分析》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《MDR1基因外显子26多态性与儿童急性淋巴细胞白血病易感性的关系》


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在研究对象家长知情同意的前提下,抽取研究对象外周血5 m L,应用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝,并提取基因组的DNA。应用PCR-RFLP技术检测MDR1基因多态性,而以β-actin基因为内参照予以扩增。引物序列与扩增片段大小详见表1。26外显子C3435T分型:PCR反应体系是25μL,其中3μL基因组DNA,而正反向引物是50 pmol。MDR1基因的PCR反应条件如下:94℃,预变性5 min,再按照94℃变性0.5 min,在55℃状态下退火1 min,72℃下延伸1 min,共进行30个循环,最后在72℃状态下延伸5 min。PCR产物经过1.5%的琼脂糖凝胶电泳,在凝胶成像系统中进行成像检测,依据MDR1基因特异性条带有无设为缺失型(-)、非缺失型(+)。