《表1 PCR引物序列及扩增片段大小》

《表1 PCR引物序列及扩增片段大小》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
本系列图表出处文件名:随高清版一同展现
《肠炎沙门菌sipC缺失株构建及部分生物学特性分析》


  1. 获取 高清版本忘记账户?点击这里登录
  1. 下载图表忘记账户?点击这里登录
P1、P2下划线:与sipC基因两翼序列互补序列;P3、P4下划线:酶切位点P1,P2 underline:Complementary sequence with both wings of sipC gene;P3,P4 underline:Restriction site

利用软件Primer Premier 5.0,根据NCBI已发布的肠炎沙门菌P125109中sipC序列设计sipC基因及上、下游同源臂,引物P1、P2用于扩增同源重组序列(3'端未加下划线的序列与质粒pKD3上氯霉素抗性基因cat两侧序列互补,5'端加下划线的序列分别与sipC基因两翼序列互补),λRed同源重组方法参照本室之前发表论文(姚丰华等,2014)。以MY1野生株为模板,引物P3、P4用于扩增sipC基因,经测序验证后克隆至表达载体pBR322(具有氨苄青霉素抗性)中,酶切位点为NdeⅠ和PstⅠ;然后将重组质粒pBR322-sipC转化到MY1ΔsipC中,获得携带sipC基因的回补株MY1ΔsipC/psipC。引物由上海生工生物工程有限公司合成,序列见表1。