《表1 所应用引物的信息:福建漳州番茄黄化曲叶病病原分子诊断及暴发成因分析》

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《福建漳州番茄黄化曲叶病病原分子诊断及暴发成因分析》


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B=C,T or G;K=G or T;R=A or G;S=C or G;V=A,C or G;W=A or T;Y=C or T

采用植物DNA试剂盒(天根生化有限公司,北京)提取番茄病样总DNA。双生病毒和TYLCV特异引物采用李刚等(2013)设计的引物PA/PB和TF3-R/TF3-F(表1)。20μL PCR反应体系:10×buffer2.5μL、0.25 mmol/L dNTPs 2μL、DNA 2.0μL、10μmol/L上、下游引物各1.0μL、0.5 U Taq DNA聚合酶1μL、ddH2O补足。PCR扩增程序:94℃预变性3min,94℃变性45 s,60℃退火45 s,72℃延伸60 s,31个循环,72℃延伸10 min。扩增结束后取3μLPCR产物于1.2%琼脂糖凝胶电泳中检测并拍照。