《表2 本研究使用的引物：大麦黄花叶病相关基因WRKY55的克隆及功能研究》

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《大麦黄花叶病相关基因WRKY55的克隆及功能研究》

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—:测序引物—:sequencing primer

针对大麦栽培品种Morex的2～4叶苗期和抽穗期的整棵植株，包括根茎叶及幼穗，分别取样混匀，液氮冷冻磨成粉末，采用Trizol法（英潍捷基 （上海）贸易有限公司） 提取总RNA，用于基因克隆。针对大田自然接种之后用于分析基因表达的大麦品种，对新叶和老叶混合取样，每个基因型取样1次，不做生物学重复，其总RNA提取方法与之前相同。DNaseI（北京全式金生物技术有限公司）处理去除残余的DNA，采用1μg的总RNA，通过SuperScriptIII逆转录酶[英潍捷基（上海）贸易有限公司]反转录得到cDNA。将获得的c DNA稀释25倍后作为模板，采用高保真聚合酶Phusion（Thermo-fisher）PCR扩增，PCR扩增引物见表2。PCR扩增条件:预变性98℃3 min；变性98℃30 s，退火58℃30 s，延伸72℃1 min30 s；循环36次；最后延伸72℃5 min；冷却4℃30 s。