《表1 本研究使用的引物:甘蔗赤霉素合成基因ScGA3ox的克隆和表达分析》

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《甘蔗赤霉素合成基因ScGA3ox的克隆和表达分析》


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实时荧光定量PCR (RT-q PCR)用ABI 7500 Realtime system (ABI,Alameda,CA,USA)进行测定。反应试剂采用Sso AdvancedTM universal SYBR?Green Supermix detection system (Bio-Rad,Hercules,CA,USA)。反应体系为:SYBR?Green Supermix 5μL,引物(10μmol·L-1)各0.5μL,c DNA 1μL,加入dd H2O至总体系达到10μL。反应条件为:95°C预变性2 min;95°C变性15 s,60°C退火1 min,40个循环。以甘蔗25SRNA作为内参基因。每个样品均设置3次重复,最后用2-ΔΔCq方法分析定量数据。所用引物见表1。