《表1 引物序列及使用:梨糖转运相关基因PbTMT4启动子克隆及功能分析》

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《梨糖转运相关基因PbTMT4启动子克隆及功能分析》


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注:下划线为XbaⅠ、HindⅢ或Bam HⅠ酶切位点。Note:Underline sequences are cleavage sites of restriction enzyme XbaⅠ,HindⅢor Bam HⅠ.

根据根癌农杆菌介导的花序浸蘸法(Zhang et al.,2006)将该基因和启动子分别用重组质粒35S-PbTMT4和ProPbTMT4-GUS分别转化拟南芥。将获得的T0代拟南芥种子消毒后播种在含有潮霉素的MS培养基中培养,初步筛选出绿色抗性苗并移入土中。提取T1代抗性苗的RNA和DNA,PCR检测(检测引物PbTMT4-F/PbTMT4-R、P1/P2,表1)转基因植株。拟南芥根长、株高和鲜质量分别采用精度为0.1 cm的钢尺和精度为0.001 g的电子秤测定,叶片糖含量采用蒽酮比色法测定。