《表1 引物信息:茶树己糖激酶基因CsHXK2的启动子克隆及表达特性分析》

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《茶树己糖激酶基因CsHXK2的启动子克隆及表达特性分析》


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ORF:开放阅读框;cTP:叶绿体转运信号肽。

根据已公布的茶树基因组信息[20],查找获得CsHXK2基因上游启动子模板序列,并设计扩增引物(表1)。以‘龙井43’组织DNA为模板,使用高保真酶PrimeSTAR HS DNA Polymerase(TaKaRa,中国)进行PCR扩增。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳、目的条带回收纯化、连接至PMD18-T载体、转化至感受态细胞后,取适量转化产物涂板于LB+氨苄青霉素(Amp)的固体培养基,随机挑选阳性单克隆送测序,获得目的启动子序列。在New PLACE数据库(A Database of Plant Cis-acting Regulatory DNA Elements;https://www.dna.affrc.go.jp/PLACE/?action=newplace)[21]预测分析启动子序列所含的顺式作用元件。