《表1 引物：乌克兰鳞鲤丙酮酸激酶基因全长cDNA克隆及组织表达分析》

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《乌克兰鳞鲤丙酮酸激酶基因全长cDNA克隆及组织表达分析》

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根据测序验证后的部分序列设计RACE引物，扩增丙酮酸羧激酶的cDNA的5′和3′末端。PCR反应程序为94℃30s、66℃30s、72℃3min，30个循环。1%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。切胶回收目的片段后连接到pGEM-T载体，连接产物转化感受态细胞DH5α，蓝白斑筛选阳性克隆，菌液PCR检测阳性克隆，按照试剂盒说明书要求5′末端挑取8个阳性克隆，3′端挑取5个阳性克隆，提取质粒后送苏州金唯智生物科技（北京）有限公司测序。本试验所用引物序列见表1。