《表1 引物序列：草鱼(♀)×赤眼鳟(♂)杂交F_1IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ cDNA克隆、序列分析及表达特征》

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《草鱼(♀)×赤眼鳟(♂)杂交F_1IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ cDNA克隆、序列分析及表达特征》

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参考GenBank中已公布的草鱼IGF-Ⅰ（EU051-323.1）和IGF-Ⅱ（EF062860.1）cDNA保守序列，利用Primer premier 6.0软件分别设计正、反引物IGF-ⅠF，IGF-ⅠR，IGF-ⅡF和IGF-ⅡR（表1）。按照TaKaRa Taq PCR说明书操作要求进行保守序列的PCR扩增。PCR程序为94℃5 min；30个循环的94℃30 s，55℃30 s，72℃60 s；最后72℃延伸5 min。采用Gel Extraction Kit（Omega Bio-Tek，美国）将PCR产物回收纯化，纯化产物连接至pTOPO-T载体后送公司测序。