《表1 引物序列：燕山葡萄VyMAPK基因的克隆及表达分析》

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《燕山葡萄VyMAPK基因的克隆及表达分析》

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采用TaKaRa公司的PrimeSTARHS DNA Polymerase高保真酶进行基因扩增。

利用植物总RNA提取试剂盒（Ta Ka Ra，日本）提取RNA，用Smart Spec3000型核酸定量仪（美国Bio-Rad公司）和1%琼脂糖凝胶电泳测定其浓度和完整性。采用Prime ScriptTM II 1st Strand c DNA Synthesis Kit试剂盒（Ta Ka Ra，日本）进行第1链c DNA的合成，以合成c DNA为模板进行基因全长克隆，利用q RT-PCR的方法检测Vy MAPK1和Vy MAPK9在燕山葡萄不同组织表达水平、植物生长调节物质及非生物胁迫的响应。以葡萄的Actin （Gen Bank登录号AY680701.1）作为内参基因，引物序列见表1。