《表1 引物设计及序列：核桃FRUITFULL(JrFUL)基因的克隆及表达分析》

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《核桃FRUITFULL(JrFUL)基因的克隆及表达分析》

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注：N表示内参引物，F表示上游引物，R表示下游引物，Y表示荧光定量PCR引物，K表示克隆引物。划线所标区域表示双酶切位点。

鉴于前人已经展开对核桃JrAP1及JrLFY基因的克隆与分析，结合本实验基因表达量分析结果，选择JrFUL基因作为克隆基因。以核桃基因组数据库的基因序列为参考，根据表达载体pBI121限制性酶切位点及基因序列特征，使用DNAMAN 8.0及Vector NTI 11.5软件设计引物，引物序列见表1，引物交由河南尚亚生物科技有限公司（郑州）合成。采用Pfu DNA高保真酶扩增目的基因JrFUL。PCR反应体系及反应条件见表4与表5。用琼脂糖（2%）检测PCR产物，使用Marker DL2 000与PCR产物同时跑电泳检测是否扩增得到目的条带。