《表1 引物序列及用途:夏枯草PvDXS基因的克隆和表达分析》
从转录组数据库中得到的夏枯草DXS基因序列两端非编码区设计一对特异性引物(DXR-F,DXR-R)(表1),以夏枯草叶片cDNA为模板,进行扩增:cDNA 2.0μL,2×Es Taq mix 10.0μL,10.0μmol·L-1正反向引物各1.0μL,加dd H2O 6.0μL至体积为20.0μL。反应程序:95℃预变性1 min;95℃变性30 s,60℃退火30 s,72℃延伸1.5 min,35个循环;72℃延伸5 min。1%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,将扩增的目的条带切胶回收纯化,并连接到pMD19-T载体上,蓝白斑筛选,菌落经PCR检测后的阳性克隆送往三博远志生物技术有限公司测序进行测序。组成型表达的actin基因(KJ010818)作为内参。
图表编号 | XD00118109500 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.12.01 |
作者 | 李璐、董诚明、张梦佳、朱畇昊 |
绘制单位 | 河南中医药大学药学院、河南中医药大学药学院、呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心、河南中医药大学药学院、河南中医药大学药学院、呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心 |
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