《表1 引物序列:夏枯草PvGGPPS基因的克隆和诱导表达分析》

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《夏枯草PvGGPPS基因的克隆和诱导表达分析》


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注:划线部分为Xho I、Bam H I的酶切位点。

以夏枯草叶片cDNA为模板进行扩增:cDNA2.0μL,2×Es Taq mix 10μL,10μmol·L-1正反向引物各1μL,dd H2O 6μL至体积为20.0μL。反应程序:95℃预变性1 min;95℃变性30 s,60℃退火30 s,72℃延伸1.5 min,35个循环;72℃延伸5 min(朱畇昊等,2016)。1%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,将扩增的目的条带切胶回收纯化,并连接到pMD19-T载体上,蓝白斑筛选,菌落经PCR检测后的阳性克隆送往上海生工生物技术有限公司进行双向测序。夏枯草中GGPPS基因的特异性引物见表1。