《表1 引物序列:向日葵MADS-Box基因HAM23-like克隆和表达分析》

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《向日葵MADS-Box基因HAM23-like克隆和表达分析》


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采用实时荧光定量法检测,利用Primer primer5.0设计HAM23-like基因的实时荧光定量引物,以向日葵e F1A为内参基因(表1)。以提取的向日葵c DNA为模板进行qRT-PCR扩增,扩增体系为:SYBR?Premix ExTaqTMⅡ5μL,Transcripition factor 23-F/R各1μL,ddH2O 2μL,模板c DNA 1μL。PCR反应在CFX96 Real-Time PCR仪(Bio-Rad,美国)上完成,3次重复。先确定最适解链温度(melting temperature,Tm),再构建标准曲线,最后进行检测。